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普通PCR

21411 2 × FastTaq Premix (with dye)

2 × FastTaq Premix (with dye)是一种包含PCR反应所需FastTaq DNA聚合酶、buffer、dNTP Mixture以及稳定剂等组分的预混液。使用时,只需在本产品中加入模板和引物即可进行PCR反应,大大简化了操作过程,降低了PCR操作过程中污染的风险。针对片段长度不超过1.5 kb的目标PCR产物,本产品支持1 sec超快PCR延伸程序 (72℃延伸程序仅需设置为1 sec)。
功能特点
规格参数
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功能特点

产品功能
2× FastTaq Premix (with dye) 是一种包含 PCR 反应所需 FastTaq DNA 聚合酶、buffer、dNTP Mixture 及稳定剂等组分的预混液;
全预混设计,仅需加入模板和引物,操作简便,显著降低污染风险;
优化配方,适于高效扩增 1.5 kb 内目标 DNA,适用于常规 PCR 反应;
预混液内含染料,扩增产物可直接用于电泳检测;
使用范围广,无需繁琐预处理,适配多种模板类型;

产品特点
高灵敏度、扩增效率高、特异性强;
包含抗体型 HotStart 技术,降低非特异性扩增风险;
适用于常规 PCR、克隆、基因检测等多种下游应用。

规格参数

产品规格参数
产品组成:
2 × FastTaq Premix (with dye)
预混液储存温度:-20°C(避免反复冻融)

货号 21411-01 21411-02 21411-03
包装规格 5 × 1 mL 5 × 21411-01 10 × 21411-01

实验流程:
1. 反应体系配制:
组分体积
Template DNAx μL
Primer 1 (10 μM)2 μL
Primer 2 (10 μM)2 μL
2× FastTaq Premix(with dye)25 μL
ddH2O补足至 50 μL

2. 推荐模板用量:
模板类型推荐模板用量
菌体直接用DNA0.1~1 μg
大肠杆菌提取DNA10~100 ng
原核DNA0.1~10 ng
真核DNA0.5~10 ng
cDNA1~5 μL(总体积的1/10以内)

3. 反应程序:
Stage 步骤 温度 时间 循环数
Stage 1 预变性 95℃ 5 min 1 cycle
Stage 2 变性 95℃ 30 sec 30-35 cycles
退火 55-65℃ 30 sec
延伸 72℃ 30 sec/kb 或 1 sec(适用于≤1.5 kb扩增)
Stage 3 充分延伸 72℃ 5 min 1 cycle

4. 引物设计建议:
引物长度建议 15-30 个碱基,3’端建议为 G 或 C;
引物GC含量为40%-60%,Tm值55-65℃,上下游引物Tm值不宜相差过大(≤1℃);
避免引物内部及引物对之间存在连续同源序列、易形成二聚体等结构;
可以通过 blast/SnapGene 等工具检测特异性及二级结构。

5. 保存条件:
-20°C 储存,≤ 0°C 运输;

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